细胞传代步骤+注意事项✅长视频预警🔥
作者: Poppy读博版
作者简介: ?欢迎回家?
描述: 细胞传代怎么操作呢？️传代时如何避免污染？今天我们一起来看一下细胞传代的过程及注意事项吧～ ✅实验准备 #00：05 观察细胞状态是否能够传代 打开紫外灯照射30min以上 打开水浴锅37℃温浴试剂（Cytiva培养基、血清、胰酶、PBS） 所有进入工作台的试剂和物品必须用酒精消毒后才可放入‼️ ✅培养基配置 #01：56 10%血清+培养基（+必要时添加1%双抗） 即5ml血清+45ml培养基（+必要时添加500ul双抗） 我们实验室常用的培养基是Hyclone的DMEM高糖培养基（适用于大多数细胞的基础培养基）和RPMI培养基（比较适用于悬浮细胞），一般建议试剂分装使用减少污染❌ ✅细胞消化 #03：05 弃去培养基后，加入PBS清洗细胞1-3次 弃去PBS，加入胰酶后放置37℃培养箱孵育 消化结束后加入等量/一半的培养基终止消化 第一次养细胞时建议每30s观察一次消化状态，巨噬细胞等不能消化的细胞可以直接刮刀刮下来，悬浮细胞跳过消化步骤 ✅细胞传代 #07：05 将消化好的细胞转移至离心管中1000rpm离心3min 弃去上清后，加入适量培养基吹打重悬细胞 分别加入新的培养瓶中，混匀，37℃培养 吹打混匀时需要小心轻柔吹打，放置剪切力过大伤害细胞。放置培养箱后需确保液面水平 #poppy的科研生活 #细胞培养 #细胞实验 #Cytiva科研好物时刻 #细胞传代 #医学生 #实验室日常
